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生化分析儀酶測試不準確原因分析
生化分析儀酶測試不準確原因分析
加入時間:2014-04-18 09:59:50 當(dāng)前新聞點擊率:2169
在生化分析的檢測測量中,酶的測定比較復(fù)雜,要求條件較高,測試比較困難。一般全自動生化分析儀只要酶的測定準確,重復(fù)性好,其他項目的測定一般沒有問題?,F(xiàn)就全自動生化分析儀酶分析中常見的測試不準確、重復(fù)性差等原因來進行分析,為使用者和維修工程師參考。 全自動生化分析儀酶的測定一般用動力學(xué)法進行測試,其原理是在酶反應(yīng)的最適條件下,用物理、化學(xué)或酶促反應(yīng)的分析方法,在反應(yīng)速度恒定期(零級反應(yīng)期)來連續(xù)觀察和記錄一定反應(yīng)時間內(nèi)底物或產(chǎn)物量的變化,以單位時間酶反應(yīng)初速度計算出酶活力的大小和代謝物的濃度。 酶的測試結(jié)果與以下幾點有關(guān): (1)340nm為波長低端,能量較低,同時340nm濾光片使用較多,易老化。所以,波長漂移不準,半寬度變化都會影響測量的準確度和重復(fù)性。 (2)動態(tài)法測試有延遲時間、測試時間要求。延遲時間在動態(tài)法中為預(yù)反應(yīng)時間,測試時間在動態(tài)法中為測試的總時間。零級動力學(xué)法是針對特定時間段而言的,酶反應(yīng)剛啟動時反應(yīng)比較復(fù)雜,雜反應(yīng)較多,必須經(jīng)過一段延遲時間才能進入穩(wěn)定反應(yīng)期,各試劑商對這兩段時間有嚴格規(guī)定。所以動態(tài)法測試一般溫度在37℃,延遲時間不少于15s為好。 (3)對于參數(shù)的輸入應(yīng)按試劑要求輸入其給定值,一般試劑商在試劑盒說明書中給予說明。 (4)反應(yīng)溫度。 (5)測試空白要準確。 (6)吸液量的大小直接影響交叉污染和測量的重復(fù)性,建議測試污染性大的物質(zhì)試劑量應(yīng)相應(yīng)增加。一般應(yīng)>400μl,一般項目為500μl即可。 (7)測試不準確、重復(fù)性差從操作上看主要有:全自動生化分析儀本身原因如比色杯中有氣泡;光源燈老化;光源電壓不穩(wěn);340nm濾光片性能變差,透射性變??;波長不準確等有關(guān)。一般檢查液路接口是否松動漏氣,更換光源燈泡和340nm濾光片即可解決。至于電路問題,加熱元件損壞,溫度不受控的問題只能由工程師解決。 總之,酶的測定影響準確度的因素很多,只要認真操作,綜合分析影響測定的各項因素,認真分析,酶測定的問題不難解決的。根據(jù)我們的經(jīng)驗只要試劑、樣品準確,保存得當(dāng),樣品預(yù)處理仔細,經(jīng)常維護、保養(yǎng)全自動生化分析儀,認真操作,問題會自行解決。想了解更多生化分析儀產(chǎn)品信息,可以撥打免費咨詢電話:400-6656-888. |