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對(duì)近期細(xì)菌明星——金葡菌的研究
加入時(shí)間:2011-12-12 10:46:34  當(dāng)前新聞點(diǎn)擊率:6386

    普朗醫(yī)療器械公司資訊——自從灣仔等速凍水餃中查出金葡菌以來(lái),它就一下子進(jìn)入了人們熱論的視野,頓時(shí)成為了細(xì)菌界當(dāng)之無(wú)愧的明星。然而,國(guó)家出臺(tái)的“降標(biāo)”政策又將該事件推向了高潮。

    通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè),金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,金葡菌)是一種革蘭氏陽(yáng)性球菌,廣泛分布于自然界,可以引起人和動(dòng)物的感染。在人體主要寄殖于鼻前庭粘膜、腹股溝、會(huì)陰部和新生兒臍帶殘端等部位,偶爾也寄生于口咽部、皮膚、腸道及陰道口等,是醫(yī)院感染常見(jiàn)的病原體之一。在醫(yī)院里,通過(guò)血細(xì)胞分析儀檢測(cè),耐甲氧西林和其它抗生素的金葡菌廣泛流行,對(duì)萬(wàn)古霉素不敏感的菌株也有所增加,給臨床治療帶來(lái)了很大的困難。金葡菌除了引起感染外,其產(chǎn)生的腸毒素可污染食物而致食物中毒,為人類(lèi)帶來(lái)非常嚴(yán)重的公共衛(wèi)生負(fù)擔(dān)。本文擬對(duì)金葡菌感染的臨床癥狀,流行病學(xué)研究,病原學(xué),分型,檢測(cè)及預(yù)防等方面做簡(jiǎn)要綜述。
1.病原學(xué)
1.1形態(tài)與染色
典型的金黃色葡萄球菌為球型,直徑0.8μm左右,顯微鏡下排列成葡萄串狀。金黃色葡萄球菌無(wú)芽胞、鞭毛,大多數(shù)無(wú)莢膜。革蘭染色陽(yáng)性,衰老或死亡后可轉(zhuǎn)為陰性。
1.2培養(yǎng)特性
金黃色葡萄球菌營(yíng)養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,需氧或兼性厭氧,最適生長(zhǎng)溫度37℃,最適生長(zhǎng)pH7.4。平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起,直徑1~2mm。血平板菌落周?chē)纬赏该鞯娜苎h(huán)。金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在10~15%NaCl肉湯中生長(zhǎng),因此利用它的這個(gè)特性進(jìn)行污染標(biāo)本分離。
1.3抵抗力
抗干燥:在干燥環(huán)境中存活數(shù)月;空氣中存在,但不繁殖;耐熱:加熱70℃1h,80℃30min不被殺死;耐低溫:在冷凍食品中不易死亡[1,2];耐高滲:在含有50%~66%蔗糖或15%以上食鹽食品中才可被抑制,能在15%NaCl和40%膽汁中生長(zhǎng).
2.流行現(xiàn)狀
2.1院內(nèi)感染及耐藥
    金黃色葡萄球菌是院內(nèi)感染的常見(jiàn)細(xì)菌之一,許多國(guó)家都設(shè)有專(zhuān)門(mén)機(jī)構(gòu),應(yīng)對(duì)金葡菌的院內(nèi)感染問(wèn)題。通過(guò)醫(yī)用X光機(jī)研究,隨著ß-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的廣泛應(yīng)用,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)隨之增加,且引起的感染和病死率有逐年增加的趨勢(shì)。MRSA可通過(guò)接觸途徑進(jìn)行傳播,即易感人群從攜帶者或感染者身上獲得MRSA,導(dǎo)致傳播流行。
    美國(guó)第一例MRSA發(fā)現(xiàn)于1968年,1975年MRSA在臨床分離出的金葡菌中僅占2.4%,而1991年則迅速增至29%?,F(xiàn)在美國(guó)的某些醫(yī)院MRSA在臨床分離出的金葡菌中可以占到30%-50%。同樣在歐洲的葡萄牙和意大利,MRSA在臨床分離出的金葡菌中占50%;土耳其和希臘>30%。荷蘭非常低,只有2%,這歸功于荷蘭人行之有效的控制策略。在歐洲的調(diào)查中,瑞士的流行率最低(1.8%),這主要由于他們?cè)卺t(yī)院內(nèi)實(shí)行了一些新的干預(yù)行為,如堅(jiān)持醫(yī)護(hù)人員的手部衛(wèi)生管理,以減少M(fèi)RSA的傳播。在北歐國(guó)家MRSA在臨床分離出的金葡菌中不足1%。在芬蘭MRSA是非常少見(jiàn)的,直到20世紀(jì)90年代醫(yī)院的病人中只有散發(fā)的病例,近幾年有報(bào)道由不同的流行株引起的醫(yī)院感染暴發(fā)。同時(shí),MRSA在社區(qū)感染中所占的比例也不斷增加。1997年日本報(bào)道了第一例耐萬(wàn)古霉素的金葡菌(vancomycin-intermediatestaphylococcusau-reus.VISA),表明金葡菌的耐藥問(wèn)題日益嚴(yán)重。
   國(guó)內(nèi)情況:經(jīng)過(guò)血球儀研究,上海地區(qū)1977~1979年MRSA占5%,1985~1986年占24%,1990年綜合性大醫(yī)院增至50%,而1993年則上升到60%。重慶地區(qū)1983~1985年為8.3%,1989~1992年上升為18.7%[13];1995年北京5家教學(xué)醫(yī)院MRSA分離率平均為47%。廣州地區(qū)1990~1995年臨床分離的MRSA占金黃色葡萄球菌的比例分別為17.9%、23.5%、30.9%、41.6%、51.9%及56.18%。其它地區(qū)的報(bào)道也一般在25%~60%之間,各個(gè)地區(qū)和醫(yī)院的MRSA檢出率都明顯有逐年增加的趨勢(shì)。
2.2食物中毒
    由金黃色葡萄球菌腸毒素引起的中毒暴發(fā)事件,近年來(lái)首推2000年“雪印奶粉”事件,14000多人受感染。根據(jù)日本衛(wèi)生部公布的數(shù)字,日本20年期間(1980-1999)由金葡菌引起的食物中毒共有2,525次暴發(fā),包括59,964人,3人死亡。
   食物中毒的傳染源,是被金葡菌感染的人和動(dòng)物。如食品加工人員、炊事員或銷(xiāo)售人員帶菌,造成食品污染;食品在加工前本身帶菌,或在加工過(guò)程中受到了污染,產(chǎn)生了腸毒素,引起食物中毒;熟食制品包裝不嚴(yán),運(yùn)輸過(guò)程受到污染;奶牛患化膿性乳腺炎或禽畜局部化膿時(shí),對(duì)肉體其他部位的污染。
    流行特點(diǎn):季節(jié)分布,多見(jiàn)于春夏季;中毒食品種類(lèi)多,如奶、肉、蛋、魚(yú)及其制品。此外,剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報(bào)道。
3.金葡菌感染引起的疾病
3.1化膿性炎癥
3.1.1局部化膿性炎癥
    金葡菌可以引起癤、癰、毛囊炎、蜂窩組織炎、傷口化膿、骨、關(guān)節(jié)的感染;也可以引起內(nèi)臟器官感染,如肺炎、膿胸、中耳炎、心包炎、心內(nèi)膜炎等.社區(qū)獲得性金葡菌性支氣管肺炎常見(jiàn)于老年人。本菌是腦室腹膜分流術(shù)后腦膜炎第二位最常見(jiàn)的病原。
3.1.2全身感染
如敗血癥、膿毒血癥等
3.2毒素性疾病
3.2.1食物中毒
進(jìn)食污染腸毒素食物后,經(jīng)30分鐘-8小時(shí)潛伏期,即可出現(xiàn)惡心、嘔吐、腹部疼痛和腹瀉等急性胃腸炎癥狀,發(fā)病1-2天可自行恢復(fù),預(yù)后良好。
3.2.2燙傷樣皮膚綜合癥
感染產(chǎn)生表皮溶解毒素的金葡菌所致。多見(jiàn)于新生兒和幼兒及免疫功能低下的成人,患者皮膚呈彌漫紅斑、起皺、繼而形成水皰,至表皮脫落。
3.2.3中毒性休克綜合癥
主要表現(xiàn)為高熱、低血壓、紅斑皮疹伴脫屑和休克等,半數(shù)以上病人有嘔吐、腹瀉、肌痛、結(jié)膜及粘膜充血,肝腎功能損害等,偶爾有心臟受累的表現(xiàn)。
3.2.4假膜炎腸炎
    假膜炎腸炎本質(zhì)是一種菌群失調(diào)性腸炎,病理特點(diǎn)是腸粘膜被一層炎性假膜所覆蓋,該假膜由炎性滲出物、腸粘膜壞死塊和細(xì)菌組成。人群中約10~15%有少量金葡菌寄居于腸道,當(dāng)優(yōu)勢(shì)菌如脆弱類(lèi)桿菌、大腸桿菌等因抗菌藥物的應(yīng)用而被抑制或殺滅后,耐藥的金葡菌就乘機(jī)繁殖而產(chǎn)生毒素,引起以腹瀉為主的臨床癥狀。
4.分型
4.1表型分型
4.1.1血清學(xué)分型
    本方法是根據(jù)金葡菌的特異性抗原進(jìn)行分型,首先制備一系列特異抗血清,再與待測(cè)菌株進(jìn)行凝集反應(yīng),依據(jù)不同凝集形式分型。但由于金葡菌分布廣泛,抗原復(fù)雜,交叉多,免疫血清效價(jià)普遍低,而且還存在一些菌群特異性抗原如A蛋白的非特異凝集的干擾,所以制備分型血清比較困難。
4.1.2噬菌體分型
    噬菌體分型方法,可以將金葡菌分為5群,26型。噬菌體分型在流行病學(xué)調(diào)查時(shí)追蹤傳染源及研究菌型與疾病種類(lèi)間的關(guān)系上均有重要意義。如腸毒素型食物中毒主要由III群菌株引起;醫(yī)院中嚴(yán)重?cái)⊙Y流行株常為I群中的52,52A,80,81型菌株;引起表皮剝脫性皮炎的菌株多屬I(mǎi)I群71型。此方法重復(fù)性好,且不需特殊設(shè)備和試劑,但其分辨率在80%左右,還有一些常見(jiàn)型需進(jìn)一步分出亞型。此外,如無(wú)其它流行病學(xué)證據(jù),噬菌體分型本身不能作為判斷菌株相關(guān)性的絕對(duì)鑒定指標(biāo)。
4.1.3耐藥譜分型
    用一系列抗生素對(duì)金葡菌做藥敏實(shí)驗(yàn),根據(jù)不同的耐藥譜分型。此方法成本低,操作簡(jiǎn)便,判定結(jié)果容易,所以應(yīng)用廣泛。耐藥譜分型缺點(diǎn)是金葡菌耐藥性強(qiáng),相同耐藥譜卻有不同的基因型或噬菌體型,即該法分辨率差;另一缺點(diǎn)是耐藥標(biāo)志物由可移動(dòng)基因(如質(zhì)粒)攜帶,質(zhì)粒的丟失或獲得會(huì)改變耐藥譜,故穩(wěn)定性差。
4.1.4凝固酶分型
    根據(jù)抗凝固酶兔血清體外中和試驗(yàn)將金葡菌凝固酶分成8個(gè)型(I~VIII型)。在日本凝固酶分型被成功用于金葡菌引起的食物中毒的流行病學(xué)調(diào)查。有報(bào)道發(fā)現(xiàn),來(lái)自金葡菌燙傷皮膚綜合征、膿腫、膿皰的分離株分別以I、IV、V型占優(yōu)勢(shì),而來(lái)自食物中毒的菌株以II、III、VI或VII型多見(jiàn)。本法簡(jiǎn)便易行,分型率高,但分辨力不強(qiáng),在流行病學(xué)研究中可作為經(jīng)典方法的補(bǔ)充。
4.2基因分型
4.2.1質(zhì)粒和質(zhì)粒限制性?xún)?nèi)切酶圖譜
    金葡菌含有數(shù)種大小和數(shù)目不等的質(zhì)粒,在一定時(shí)間內(nèi),這種質(zhì)粒特征保持相對(duì)穩(wěn)定,可根據(jù)質(zhì)粒大小和數(shù)目分型(質(zhì)粒圖譜,plasmidprofile)。分析不同來(lái)源的金葡菌含有分子量接近的質(zhì)粒,尤其只含一種質(zhì)粒時(shí),可用限制酶消化質(zhì)粒,根據(jù)酶切片段的大小和數(shù)目來(lái)進(jìn)一步鑒別其相關(guān)性(質(zhì)粒指紋圖譜,plasidfingerprinting)。這種方法具有區(qū)分能力強(qiáng),結(jié)果穩(wěn)定的特點(diǎn),可以區(qū)分流行株和非流行株,但對(duì)于質(zhì)粒丟失及發(fā)生基因重組的菌株不能準(zhǔn)確分型,因此,最好是盡快在限定時(shí)間內(nèi)檢測(cè)質(zhì)粒。
4.2.2PFGE分型
    金葡菌DNA經(jīng)限制性?xún)?nèi)切酶(SmaI、CspI)消化后,可獲得5~20條片段(10~700kb),根據(jù)電泳條帶的不同形式對(duì)其分型。PFGE分型在辨別能力,分型和重復(fù)性方面具有其它分子分型所不具有的優(yōu)勢(shì),所以被認(rèn)定為金葡菌分型的金標(biāo)準(zhǔn)。它已經(jīng)被廣泛用于金葡菌的醫(yī)院感染和甲氧西林抗性的流行病學(xué)調(diào)查。其缺點(diǎn)主要在于需特殊儀器,費(fèi)時(shí)太長(zhǎng)且過(guò)程繁瑣。
4.2.3核糖體分型
    核糖體分型屬于探針?lè)中?。核糖體核糖核酸(rRNA)基因是細(xì)菌進(jìn)化過(guò)程中最為保守的基因,在細(xì)菌染色體上可存在多個(gè)拷貝,以rRNA的基因片段為探針可檢出含rRNA的DNA片段。金葡菌染色體DNA經(jīng)限制酶切消化后,經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分離,然后與細(xì)菌rRNA探針雜交,根據(jù)雜交條帶的數(shù)目和大小不同鑒別菌株。本方法分型率高,分辨力強(qiáng),重復(fù)性好,結(jié)果判定容易(雜交帶一般較少,肉眼即可辨別),但技術(shù)復(fù)雜,難以普及。
4.2.4隨機(jī)引物PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的多態(tài)性(RAPD)
    1990年Welsh和McClelland以及Williams等同時(shí)創(chuàng)立隨機(jī)擴(kuò)增DNA多態(tài)性分析和AP-PCR。它與傳統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)PCR的不同之處是采用隨機(jī)引物進(jìn)行擴(kuò)增,隨機(jī)引物是根據(jù)革蘭陰性腸桿菌科細(xì)菌的重復(fù)序列而設(shè)計(jì)的,這些引物能檢測(cè)金葡菌DNA可變區(qū)。首先選擇隨機(jī)的寡核苷酸引物,一般選擇2~3條引物,一條引物難以有效辨別不同菌株,通過(guò)增加引物數(shù)量,可對(duì)任何復(fù)雜的生物變異進(jìn)行基因分析,但引物條數(shù)越多,操作越復(fù)雜。然后在較低的溫度下啟動(dòng)新鏈合成,從而產(chǎn)生具有型、株特異性的DNA擴(kuò)增片段,經(jīng)電泳后根據(jù)其產(chǎn)生的不同條帶對(duì)細(xì)菌分型。Cetinkaya等[20]用此方法對(duì)外科暴發(fā)流行的MRSA進(jìn)行分型研究,證實(shí)AP-PCR是一種簡(jiǎn)單快速的分型方法。該方法無(wú)需了解待測(cè)基因組的堿基序列,不受DNA限制性?xún)?nèi)切酶的限制,具有敏感、快速、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn),但不同實(shí)驗(yàn)條件對(duì)結(jié)果有影響,因此必須對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行嚴(yán)格控制,確定最佳反應(yīng)條件。
4.2.5MLST
    MLST是一種高分辨力的分型方法。金葡菌內(nèi)部的7個(gè)基因?yàn)閍rcC、aroE、glpF、gmk、pta、tpi、yqiL,其基因片段長(zhǎng)度分別為456,456,465,429,474,402,516bp,在不同菌株,每一片段由于不同的等位基因而有不同的序列[21]。用7對(duì)引物擴(kuò)增7個(gè)基因,再測(cè)序擴(kuò)增產(chǎn)物,上公布的相應(yīng)基因的等位基因進(jìn)行比較,獲得該菌株針對(duì)7個(gè)看家基因的等位基因譜;提交MLST網(wǎng)站,確定金葡球菌臨床分離株的序列分型(SequenceType,ST),并與國(guó)際菌株的資料進(jìn)行比較,從而鑒定是一種新的型別還是原有型別。MLST適合長(zhǎng)期大范圍的流行病學(xué)調(diào)查研究。但由于是根據(jù)基因序列進(jìn)行分型,少數(shù)核苷酸序列的不同就會(huì)導(dǎo)致型別不同,因此技術(shù)要求嚴(yán)格。
4.2.6特異功能集團(tuán)基因的多態(tài)性分型
4.2.6.1凝固酶基因多態(tài)性
    由于編碼不同凝固酶的基因序列不同,根據(jù)凝固酶基因序列設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增其可變區(qū),再用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,由于可變區(qū)多態(tài)性導(dǎo)致PCR產(chǎn)物不同。最后根據(jù)消化產(chǎn)物電泳長(zhǎng)度多態(tài)性分析菌株間關(guān)系。
4.2.6.2蛋白A基因多態(tài)性
    編碼蛋白A的基因spa含有幾種不同的功能區(qū),此方法主要針對(duì)Fc結(jié)合區(qū)和X區(qū),前者含有2~5個(gè)重復(fù)序列,每個(gè)序列長(zhǎng)為160bp,后者含有最多可達(dá)15個(gè)長(zhǎng)為24bp的重復(fù)序列,X區(qū)由于重復(fù)序列數(shù)目不同而具有高度的多態(tài)性。根據(jù)spa基因序列,設(shè)計(jì)引物對(duì)spa內(nèi)的這兩個(gè)功能區(qū)進(jìn)行選擇性擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物具有多態(tài)性,酶切后產(chǎn)生不同的電泳圖譜,從而對(duì)不同的菌株分型。
4.2.6.3mecA基因高變區(qū)(HVR)長(zhǎng)度多態(tài)性
    此方法只適合MRSA菌株分型,在金葡菌染色體上,位于耐藥決定基因mecA和一端類(lèi)似插入序列因子IS431之間存在著一段長(zhǎng)約204bp的基因高變區(qū),它在不同的MRSA菌株中呈現(xiàn)出不同長(zhǎng)度的不同片段,其長(zhǎng)度多態(tài)性主要是由一個(gè)直接重復(fù)單位的序列不同而引起,根據(jù)這個(gè)重復(fù)單位序列擴(kuò)增產(chǎn)物多態(tài)性分型。因此在HVR長(zhǎng)度多態(tài)性的基礎(chǔ)上,可以用PCR擴(kuò)增方法來(lái)區(qū)分不同的MRSA菌株。它可把MRSA分為5型[22]。
    目前任何一種分型方法都不能單獨(dú)作為菌株相關(guān)性判斷的絕對(duì)指標(biāo),必須結(jié)合其他流行病學(xué)資料,根據(jù)現(xiàn)實(shí)情況的需要,選擇兩種或更多的有效方法來(lái)鑒別菌株,以提高分型率、分辨力及結(jié)果的可靠性,為控制金葡菌感染提供詳實(shí)的流行病學(xué)資料。
5、檢測(cè)方法
金葡菌的檢測(cè)根據(jù)細(xì)菌的分離培養(yǎng)、染色觀察、血漿凝固酶試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)、耐藥性檢測(cè)即可作出初步的判斷。下面介紹一些分子生物學(xué)和快速檢測(cè)方法
5.1分子生物學(xué)的檢測(cè)方法
5.1.1傳統(tǒng)PCR方法
    傳統(tǒng)PCR方法檢測(cè)金葡菌的特異基因,如耐熱核酸酶基因(nuc);檢測(cè)金葡菌的保守基因16sRNA;用多重PCR方法可在較短的時(shí)間內(nèi)檢測(cè)金葡菌的多種毒素基因,如腸毒素A-E(entA,entB,entC,entD,entE),表皮剝脫毒素A和B(eta,,etb),中毒性休克綜合癥毒素(tst)[23]。
5.1.2熒光PCR
    熒光PCR技術(shù)在普通PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累檢測(cè)整個(gè)PCR反應(yīng)的過(guò)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量。Deurenberg[24]用Real-timePCR檢測(cè)金葡菌的tst基因,作為分子流行學(xué)的一種有效的監(jiān)測(cè)手段。
5.2快速檢測(cè)方法
5.2.1、StaphychromII實(shí)驗(yàn)
    由顯色底物,人凝血酶原和蛋白酶抑制劑組成的StaphychromII實(shí)驗(yàn),是一種快速,可靠,易操作的檢測(cè)方法,可在兩個(gè)小時(shí)得到結(jié)果。Nathalie等人[25]將該方法與凝固酶試管凝集實(shí)驗(yàn)和乳膠凝集實(shí)驗(yàn)做了比較,對(duì)293株從臨床分離的菌株進(jìn)行檢測(cè),StaphychromII實(shí)驗(yàn)敏感性,特異性,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為98.1,100,100,and95.1%;乳膠凝集實(shí)驗(yàn)為98.6,98.7,99.6和96.3%,試管凝集實(shí)驗(yàn)為97.6%,98.7%,99.5,和93.9%。通過(guò)血液細(xì)胞分析儀研究,證明該方法具有與乳膠凝集實(shí)驗(yàn)相同的敏感性,具有100%的特異性。但該方法較昂貴,不易在基層單位推廣。
5.2.2金黃色葡萄球菌鑒別培養(yǎng)基
    現(xiàn)在已有商業(yè)化的金葡菌顯色培養(yǎng)基,僅需通過(guò)單一菌落的典型色彩即可進(jìn)行初步鑒定,大大提高了對(duì)金葡菌的檢出率。S.aureusID培養(yǎng)基,法國(guó)科瑪嘉干粉顯色培養(yǎng)基和Baird-Parker+RPF培養(yǎng)基(生物梅里埃公司)都屬于同類(lèi)產(chǎn)品,可通過(guò)特殊的菌落顏色,在18-20小時(shí)對(duì)金葡菌進(jìn)行初步鑒定。Perry[26]用S.aureusID培養(yǎng)基,法國(guó)科瑪嘉干粉顯色培養(yǎng)基和傳統(tǒng)培養(yǎng)基對(duì)金葡菌的分離培養(yǎng)進(jìn)行比較,證明S.aureusID培養(yǎng)基對(duì)于金葡菌的分離和鑒定,是一種敏感性和特異性很高的培養(yǎng)基。
5.2.3 3M金黃色葡萄球菌快速測(cè)試片法
    原理:該測(cè)試片由兩部分組成,第一部分是金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基片,此檢測(cè)片含有改良的Baird-Parker營(yíng)養(yǎng)物及一冷水可溶的膠體,第二部分是熱穩(wěn)定核酸酶(Tnase)反應(yīng)片,包含有DNA,甲苯胺藍(lán)(toluidineblue-O)及四唑指示劑(tetrazolium),此指示劑有助于菌落的計(jì)數(shù)及確定葡萄球菌熱穩(wěn)定核酸酶的存在。
5.2.4金黃色葡萄球菌乳膠凝集試驗(yàn)
    作為免疫學(xué)方法之一,乳膠凝集試驗(yàn)在金黃色葡萄球菌的檢測(cè)分析中,既可用作初篩,同時(shí)也是確認(rèn)方法之一。這一類(lèi)的產(chǎn)品也很多,包括生物梅里埃公司的SlidexStaph-kit等。
6.預(yù)防措施
6.1加強(qiáng)醫(yī)院感染的控制
    醫(yī)療機(jī)構(gòu)要根據(jù)本單位內(nèi)金葡菌的流行和傳播情況,病人中存在的易感危險(xiǎn)因子及相應(yīng)的傳染源制定一個(gè)有效的控制方案。必須堅(jiān)持基礎(chǔ)的感染控制措施,包括教育醫(yī)務(wù)人員正確洗手;在接觸病人的體液,傷口和污染物時(shí)應(yīng)帶手套并穿一次性防護(hù)服;對(duì)病人或疑似病人采取正確的隔離方式;醫(yī)療器械的消毒和環(huán)境的凈化;早期檢查帶菌者,醫(yī)院應(yīng)加強(qiáng)對(duì)新入院及MRSA易感者的檢查,尤其是燒傷病區(qū)、ICU、呼吸病區(qū)及小兒科患者。同時(shí)細(xì)菌室應(yīng)準(zhǔn)確選用檢測(cè)手段進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè),發(fā)現(xiàn)MRSA及時(shí)向臨床報(bào)告,以便控制感染和隔離治療。
6.2合理使用抗生素
    目前臨床濫用抗生素的現(xiàn)象對(duì)MRSA的流行起了推波助瀾作用,因此,在選擇抗生素時(shí)應(yīng)慎重,以免產(chǎn)生MRSA菌株。如對(duì)大手術(shù)后預(yù)防深部葡萄球菌感染,使用第一代、第二代頭孢菌素為好(如頭孢唑林、頭孢呋肟等)。第三代頭孢菌素抗葡萄球菌效果反而不如第一代的好。第三代頭孢菌素的長(zhǎng)期使用與MRSA的耐藥率呈平行關(guān)系。對(duì)分離菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn),必要時(shí)可進(jìn)行分子生物學(xué)分型。
6.3清除攜帶的金葡菌
    有研究表明病人或醫(yī)院的工作人員中金葡菌的攜帶者,可以作為金葡菌傳播的傳染源。因此可以嘗試根除定植在住院病人和醫(yī)務(wù)人員的金葡菌,但應(yīng)嚴(yán)格掌握適應(yīng)癥,以防耐藥性的產(chǎn)生。
6.4免疫學(xué)方法
    金葡菌疫苗接種可提升體內(nèi)特異性抗體滴度,同時(shí)也增加機(jī)體細(xì)胞免疫力,與抗生素有協(xié)同作用,并能降低抗生素所產(chǎn)生的選擇壓力,延緩耐藥菌的產(chǎn)生。但由于金葡菌疫苗為滅活全菌疫苗,除保護(hù)性免疫原外,還含有很多不相關(guān)的和有毒的成分,毒副反應(yīng)較大,使臨床應(yīng)用受限。研究者們也在積極致力于新型疫苗的研制。
7.治療
    目前,MRSA感染的治療已成為臨床非常棘手的難題之一。經(jīng)血細(xì)胞分析儀研究表明,一些新型的ß-內(nèi)酰胺類(lèi)、糖肽類(lèi)、鏈陽(yáng)菌素及唑烷酮類(lèi)藥物具有很強(qiáng)的抗菌活性。
    萬(wàn)古霉素(vancomycin)是治療MRSA感染療效肯定的糖肽類(lèi)殺菌劑,它可與磷霉素、氨基糖苷類(lèi)、利福平和夫西地酸等合用。通過(guò)醫(yī)用X光機(jī)研究,臨床上一直把它作為治療MRSA感染的首選藥物,但近年來(lái)已有MRSA對(duì)萬(wàn)古霉素敏感性降低的報(bào)道。有血球儀研究證明:對(duì)于這種對(duì)萬(wàn)古霉素敏感性降低的金黃色葡萄球菌(vancomycin-intermediatestaphylococcusau-reus.VISA)感染,聯(lián)合應(yīng)用萬(wàn)古霉素和具有抗葡萄球菌活性的β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素,可以取得很好的療效。
    總而言之,今后既要研究開(kāi)發(fā)具有高度抗MRSA活性的新藥,又要保護(hù)性使用現(xiàn)有的對(duì)MRSA有效的藥物,尤其不主張預(yù)防性用藥。

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